DiR
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DiR 是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料常用于标记细胞质膜。DiR 的两个 18-碳链插入到细胞膜,从而进行特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染料转移。
DiR(近红外荧光)和其他细胞膜荧光染料如 DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)配合使用,为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。
DiR 染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用进行质膜染色)。

1. 一般性质

产品名称: DiR (中文:细胞膜近红外荧光探针

CAS 号: 100068-60-8

产品货号: OLM-0201-1MG

外观性状: 蓝色至深蓝色固体 

分 子 式: C63H101IN2

分 子 量: 1013.39

净分子量(F.W.) N/A

结 构 式:

2.png

光 谱: λEx/λEm:748nm/780nm

溶 解 度: 溶于 DMF,DMSO,甲醇 质控项目: 如,HPLC(≥95%)、1H NMR

2. 产品描述

DiR 是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料常用于标记细胞质膜。DiR 的两个 18-碳 链插入到细胞膜,从而进行特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染料转移。

DiR(近红外荧光)和其他细胞膜荧光染料如 DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红 色荧光)配合使用,为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。

DiR 染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化 的过程。此外,在固定透化(室温下用进行质膜染色)。

3. 产品用法

用于细胞膜染色,细胞融合、粘附和迁移示踪剂,小动物成像。

3.1 染色液制备:

(1)配置 DMSO 或 EtOH 储存液:储存液用 DMSO 或 EtOH 配置浓度 1~5 mM。 注:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。 (2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS 或 PBS)稀释储存液,配制 浓度为 1~5μM 的工作液。

 注:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。 建议从推荐浓度的 10 倍范围 内开始最优浓度的摸索。

3.2 悬浮细胞染色: 

(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为 1×10 6 /mL。 (2)37℃ 孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间 不同。可以 20 min 作为起始孵育 时间,之后优化体系以得 到均一的标记结果。 (3)孵育结束,1000~1500 rpm 离心 5 min。倾倒上清液, 再次缓慢加入 37 ℃预热的生长培 养液重悬细胞。 (4)重复步骤(3)两次以上。

3.3 贴壁细胞的染色:

 (1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。 (2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但表面要 保持湿润。 (3)在盖玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液,轻轻晃动 使染料均匀覆盖所有细胞。 (4)37℃ 孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以 20 min 作为起始孵育时 间,之后优化体系以得到均一的标记结果。 (5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2~3 次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵 育 5~10 min,然后吸干培养基。但要使表面保持湿润。


4. 注意事项
4.1 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
4.2 DiR 染色固定的细胞或组织样品时,样品宜使用配制在 PBS 中的 4% 多聚甲醛进行固定,使 用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
4.3 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

4.4 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


5. 储存条件
−20℃干燥避光保存,产品有效期为 12 个月。







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