1. 一般性质
产品名称: AF 350 NHS Ester(中文:AF 350 琥珀酰亚胺酯)
CAS 号: 200554-19-4
产品货号: OLE-0901-1MG
外观性状: 固体
分 子 式: C16H14N2O9S·N6H15N
分 子 量: 410.35
净分子量(F.W.) N/A
结 构 式:
光 谱: λmax:346nm (Buffer pH 7), 353nm (MeOH);λEx/λEm:353±3nm/437±4nm;消光系数:20000±2000 cm-1M-1
溶 解 性: 溶于水、DMSO、DMF
质控项目: 如,HPLC(≥90%)
2. 产品描述
Alexa 350 NHS Ester(AF350 NHS)是一种蓝色荧光染料,适合与 350nm紫外激光一起使用, 具有水溶性,对 4至 10范围内的 pH 变化不敏感。Alexa 350 NHS Ester 用于将该染料与蛋白质或抗体结合。
3. 产品用法
适用于荧光标记。
典型偶联反应
您可以将胺反应性试剂与几乎任何蛋白或肽偶联(提供的方案针对 IgG 抗体进行了优化)。您可以针对任何量的蛋白缩放反应,但为了获得最佳结果,蛋白的浓度应至少为 2 mg/mL。我们建议使用三种不同的反应性试剂/蛋白摩尔比进行三种不同程度的标记。
Alexa Fluor™ NHS 酯通常溶于高质量的无水二甲基甲酰胺 (DMF) 或二甲亚砜 (DMSO) (D12345) 中,并在 0.1–0.2 M 碳酸氢钠缓冲液(pH 值 8.3)中于室温下进行反应,持续 1 小时。由于末端胺的 pKa 低于赖氨酸 ε-氨基基团的 pKa,您可以使用接近中性 pH 值的缓冲液对胺末端进行更具选择性的标记。
偶联物纯化
通常使用凝胶过滤柱(如 Sephadex™ G-25、BioGel™ P-30 或等效柱)将标记抗体与游离 Alexa Fluor™ 染料分离。对于更大或更小的蛋白,选择具有适当分子量滤除点的凝胶过滤介质或通过透析纯化。
4. 储存条件
-20℃避光储存,干燥。